产品货号:
ZN3390
中文名称:
10%彩色PAGE胶快速配制试剂盒
英文名称:
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒适用于Tris-甘氨酸电泳体系,其中包括PAGE凝胶制备所需全套试剂,只需自备超纯水和制胶器具,不需要额外加入TEMED,即可制备PAGE凝胶。所配制的浓缩胶带有颜色,便于上样。本试剂盒中过硫酸铵以溶液形式提供,可保证过硫酸铵溶液在4℃稳定保存三个月。本试剂盒分离胶和浓缩胶缓冲液均含有SDS,只适用于变性凝胶电泳。
- 快速:最少需要2分钟可灌注多块凝胶,15min即可凝胶;
- 安全:彻底告别TEMED,避免接触过硫酸铵粉末,远离有毒试剂;
- 可靠:省去繁琐计算稀释操作,方法更可靠,电泳效果好,条带更清晰;
组分 | 规格 |
浓缩胶溶液 | 80mL |
彩色浓缩胶缓冲液 | 80mL |
分离胶溶液10% | 250mL |
分离胶缓冲液 | 250mL |
改良型过硫酸铵溶液 | 8mL |
一次性配胶杯 | 50个 |
保存:2~8℃,其中改良型过硫酸铵溶液长期储存置于-20℃,有效期1年。
一个包装的本试剂盒可制成mini型0.75mm厚度凝胶125块,或mini型1.00mm厚度凝胶90块,或mini型1.50mm厚度凝胶50块。
- 蛋白条带的清晰和平直与电泳条件相关,如果需要蛋白条带更加清晰、平直,建议电泳时电压在100-120V之间,如需要加快电泳速度,可增加至150V。
- PAGE凝胶的凝聚速度与温度和过硫酸铵的用量密切相关,可通过改变过硫酸铵的用量,控制PAGE凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作,应根据实际操作情况做适当的调整。
- 本制品已加入TEMED替代品,如需进一步加速凝胶,可在配制时加入TEMED。
- 在分离胶上层加纯水时要小心操作,加水时速度不能太快。
- 彩色浓缩胶缓冲液内含有染料,因染料本身性质,长期静置后会产生沉淀,使用前请轻柔混匀。
- 本制品凝胶速度快,不需将凝胶模具放在37℃温箱或者空调热风口下,正常室温条件下配制即可。
- 灌制分离胶(以一块0.75/1.00/1.50mm厚的mini胶为例)
- 参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
- 取等体积的分离胶溶液10%和分离胶缓冲液,各2/2.7/4mL,混匀。
- 向步骤2制备的混合溶液内加入40/54/80μL的改良型过硫酸铵溶液,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
- 在凝胶模具中灌入步骤3制备的混合溶液,使液面距离短玻璃板上沿约1.5cm即可,然后分离胶溶液上轻轻覆盖上一层水层,使凝胶表面保持平整。
- 室温静置10~15分钟,待分离胶和水层之间出现清晰界面后,说明胶已凝固。
- 参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
- 灌制浓缩胶(以一块0.75/1.00/1.50mm厚的mini胶为例)
- 去除覆盖在分离胶上的水层。
- 取等体积的浓缩胶溶液和彩色浓缩胶缓冲液,各0.5/0.75/1mL,混匀。
- 向步骤2制备的混合溶液内加入10/15/20μL的改良型过硫酸铵溶液,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
- 将步骤3制备的混合溶液加至分离胶的上层,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。将梳子慢慢插入凝胶内,避免产生气泡。
- 静置15分钟,等待浓缩胶凝固,小心地拔出梳子,用注射器或枪头,吸取电泳缓冲液将加样孔冲洗干净,即可进行常规电泳操作。
- 去除覆盖在分离胶上的水层。
附表1.SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围
SDS-PAGE分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
6% PAGE凝胶 | 70~300kD |
8% PAGE凝胶 | 30~200kD |
10% PAGE凝胶 | 20~80kD |
12.5% PAGE凝胶 | 15~60kD |
15% PAGE凝胶 | 10~45kD |
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